PROTOCOLO

• Tamaño de la muestra: 50-200 µl de sangre entera (fresca o congelada)/hasta 25 mg de tejido/hasta 25 mg de tejido incluido en parafina/hisopo bucal/hasta 15 ml de líquido amniótico/1 × 107 células cultivadas/25 mg de insectos/10 cabellos (incluidas las células del folículo) )
• Rendimiento esperado: hasta 50 µg de ADN
• Tiempo de operación: 20 minutos o menos
• Volumen de elución: 30-100 µl

El mini kit gMAX Genomic DNA ha sido optimizado para la purificación de ADN genómico, mitocondrial y viral a partir de tejido de sangre completa (fresca y congelada), tejido fijado con formalina e incluido en parafina, células cultivadas, hisopos bucales, líquido amniótico, cabello e insectos en un kit conveniente. Este kit de extracción de ADN utiliza proteinasa K y sal caotrópica para lisar células y degradar proteínas, lo que permite que el ADN se una a la matriz de fibra de vidrio de la columna de centrifugación. Los contaminantes se eliminan utilizando un tampón de lavado y el ADN genómico purificado se eluye mediante un tampón de elución bajo en sal, TE o agua. Todo el procedimiento se puede completar en menos de 30 minutos sin extracción con fenol/cloroformo ni precipitación con alcohol. El ADN purificado es adecuado para su uso en PCR u otras reacciones enzimáticas.

La calidad del mini kit gMAX Genomic DNA se prueba lote a lote aislando ADN genómico de 200 µl de sangre humana completa. El ADN purificado (5 µg con una proporción A260/A280 de 1,8-2,0) se cuantifica con un espectrofotómetro y se analiza mediante electroforesis.

El kit gMax es uno de los kits de extracción de ADN genómico más versátiles del mercado actual. Tiene la capacidad de purificar ADN genómico de una amplia gama de tipos de muestras con protocolos fáciles de usar y un precio muy económico.

INFORMACIÓN TÉCNICA:

¿A qué kit de la competencia es comparable? Kit QIAGEN DNeasy

¿Se pueden utilizar los reactivos QIAGEN con columnas IBI? Sí, cualquier cosa que esté “basada en lisis” funcionará con columnas IBI.

¿Puedo extraer ADN genómico de una muestra de leche usando este kit? Sí, este kit funcionará cuando use una muestra de leche. Para muestras pequeñas (200 µl), utilice el protocolo de sangre. Para muestras más grandes (1 ml), utilice el protocolo de líquido amniótico.

Cuando la muestra de tejido está ligeramente degradada, ¿qué puedo hacer para mejorar el bajo rendimiento de ADNg?1. Después de agregar el tampón GT y Pro K a la muestra, proceda a agitar y luego incube durante la noche a 60 °C. Durante la incubación nocturna, utilice un baño de agua con agitación automática para agitar continuamente la muestra durante la incubación. 2. Realice el paso de eliminación de ARN según lo recomendado en el protocolo. 3. Precaliente el tampón de elución a 60 °C para el paso de elución. 4. El uso de grandes cantidades de tampón de elución (100 µl – 200 µl) durante el paso de elución puede aumentar el rendimiento del ADN. 5. Homogeneizar las muestras de tejido antes de la lisis para ayudar en la digestión de Pro-K.

¿Funcionará el kit gMax para materia fecal? Puede comprar nuestro kit IBI Fecal DNA para extraer ADN de materia fecal (IB47820-IB47822).

¿Cuál es el rendimiento típico de tejido con los kits gMax? Dependiendo del material de partida, puede ser desde más de 50 µg con 25 mg de tejido, o entre 10 y 40 µg con 20 mg de tejido.

¿Dónde puedo conseguir más solución de Proteinasa K? Puede adquirir nuestra Solución de Proteinasa K-5 ml (IB05406 20 mg/ml) y diluirla con agua purificada (ddH20) hasta una concentración de 10 mg/ml.

COMPONENTES DEL KIT: 

Para eficientar sus kits puede adquirir buffers de repuesto